细胞冻存与复苏
细胞冻存技术是将细胞储存在低温环境中，减少细胞代谢，维持其细胞状态和有效性的必要条件，在冷冻的过程中防止细胞在冷冻过程中形成冰晶，对细胞造成损害，实现长期储存的一种技术。

冻存细胞产品的有效性和稳定性主要取决于冻存保护液, 经典的冻存液往往由 DMSO、胎牛血清（提供营养）和基础培养基等成分组成，因成本低廉、效果优良、易操作等特点而被广泛应用于科研，然而这些成分大大限制了冻存细胞产品的临床应用。由于胎牛血清存在病原体传播和免疫反应的潜在风险，血清的组分、来源和生产批次对培养的细胞可能会有不良或不一致影响，临床使用存在很大风险；并且细胞培养基不能直接输注到人体。随着冻存细胞从科研应用走向产业转化，冻存要求也随之改变，冻存液需满足无血清，无动物源成分，所有原料均应符合临床或药物需求等要求，因此，无血清细胞冻存液应运而生。

为了获得大量高纯度、高增殖、杀伤性强的免疫细胞制品以满足临床研究和大健康产业的需求，冻存细胞的过程中应注意以下几点：

1、优选安全高效的 LaboBanker2 无血清细胞冻存液进行冻存。
根据《免疫细胞治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》要求，生产过程中应尽量避免使用动物源原材料，如动物血清、动物来源的蛋白质，尽可能使用成分明确的非动物源性材料替代。LaboBanker2 无血清细胞冻存液不含动物蛋白及牛血清成分，成分明确，避免了外源物质的污染风险；并且该冻存液使用安全稳定的高分子聚合物，无需程序降温，能使细胞在冻结前迅速失水，减少冰晶的形成，能够更好的保存细胞的生物性能。

2、选择处于对数增长期的细胞进行冻存。
冻存的细胞应具有较高的活力，选择处于对数增长期的细胞，此时细胞状态良好且细胞数多，更能保证冻存后细胞的质量。

3、对冻存细胞进行预处理。
免疫细胞冻存前使用不含 Ca2+、Mg2+的 DPBS 清洗，可避免细胞结团，维持细胞渗透压平衡，保持 PH 稳定，供细胞和组织一个相对稳定的离子环境，同时去除残留的培养基及干扰物质，清洗完毕使用无血清冻存液混匀即可。

4、最佳冻存密度为 5×105～1×107/ml。
研究表明，冻存细胞的密度也会影响冻存效果。过高的 PBMC 冻存密度会影响其细胞活性及细胞扩增倍数，过低的冻存密度则会因为增大冻存体积而大大提高冻存成本。

5、冻存 PBMC 的复苏
PBMC 经过冷冻保存后，表面的超微结构以及酶冻存溶解后的构型可能发生一些变化，从而导致其生物活性及敏感度发生改变。在使用冻存 PBMC 专用复苏液重悬细胞时，应使细胞密度为 2.0～2.5×106cells/ml，并置于 5%CO2、37℃ 培养环境中孵育 60 min，使细胞状态得以迅速恢复。
随着未来越来越多的免疫细胞治疗产品获批上市以及生物医药产业的发展，具备无 DMSO、无动物源、无蛋白、化学成分明确等特点的 GMP 级别无血清细胞冻存液才能更好地支持蓬勃发展的细胞治疗产业，保证临床应用过程中细胞冻存环节的安全性。贝索细胞多年来一直致力于细胞治疗相关培养液及试剂的研发与创新，未来也将紧跟行业技术的发展，持续优化更新产品及技术升级，为您提供细胞最优的细胞冻存整体解决方案。